使用PCR檢測試劑盒時(shí)需要注意哪些要點(diǎn)？
PCR檢測試劑盒用于檢測疑似感染動(dòng)物的血清或組織中的CSFV，適用于CSFV的檢測、診斷和流行病學(xué)調(diào)查。該試劑盒不能用于區(qū)分強(qiáng)弱毒。
PCR檢測試劑盒需要自備的器材：
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、PCR擴(kuò)增儀、電泳儀、電泳槽、紫外凝膠成像儀(或紫外分析儀)、微波爐、組織研磨器、-20°C冰箱、可調(diào)移液器(2H兒、204、200凡、1000風(fēng))。
2.耗材:眼科剪、眼科鑷、稱量紙、20mL-次性注射器、生理鹽水、瓊脂糖、500mL量簡、500mL錐形瓶、經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水處理的滅菌1.5mL離心管和吸頭(10風(fēng)、200HL、1000兒)、滅菌雙蒸水。
PCR檢測試劑盒的使用注意事項(xiàng)：
1.所有接觸病料的物品均應(yīng)合理處理，以免污染實(shí)驗(yàn)室。
2.PCR整個(gè)試驗(yàn)分配液區(qū)、模板提取區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、電泳區(qū)。流程順序?yàn)榕湟簠^(qū)模板提取區(qū)擴(kuò)增區(qū)電泳區(qū)。嚴(yán)禁器材和試劑倒流。
3.所有試劑應(yīng)在規(guī)定的溫度儲(chǔ)存，-20"C保存的各試劑使用前應(yīng)放于室溫*融化，使用后立即放回-20°C。
4.染色液低毒，應(yīng)于室溫條件避光保存，操作時(shí)應(yīng)戴上手套。
5.注意防止試劑盒組分受污染。使用前將紅蓋管8000rpm離心15s,使液休全部沉于管底，放于冰盒中，吸收液體時(shí)移液器吸頭盡較在液體表面層吸取。
6.不要使用超過有效期限的試劑，試劑盒之間的成分不要混用。
7.在RNA提取過程中，避免RNA酶污染，盡量縮短操作時(shí)間。
8.嚴(yán)格遵守操作說明可以獲得較好的結(jié)果。操作過程中移液、定時(shí)等全部過程必須準(zhǔn)確。
9.反復(fù)凍融試劑將減低檢測靈敏度兒建議在3次內(nèi)用完，請(qǐng)嚴(yán)格按試劑金說明書操作。
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