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線粒體檸檬酸(MCA)含量測(cè)試盒

簡(jiǎn)要描述:

線粒體檸檬酸(MCA)含量測(cè)試盒是線粒體三羧酸循環(huán)的第一個(gè)中間產(chǎn)物,由檸檬酸合酶催化乙酰CoA與草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循環(huán)強(qiáng)度的主要指標(biāo)之一。

更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1441

商品詳情:
線粒體檸檬酸(MCA)含量測(cè)試盒測(cè)定意義:

CA是線粒體三羧酸循環(huán)的第一個(gè)中間產(chǎn)物,由檸檬酸合酶催化乙酰CoA與草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循環(huán)強(qiáng)度的主要指標(biāo)之一。

配合測(cè)定酸含量、酸脫氫酶活性、乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)酸含量和酸脫氫酶活性變化可以反映糖酵解進(jìn)行程度,(2)綜合分析酸含量、酸脫氫酶活性和乙酰CoA含量變化可以反映脂肪酸β-氧化途徑提供的乙酰CoA情況,(3)乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量變化可以反映三羧酸循環(huán)進(jìn)行狀況。

貨號(hào)

規(guī)格

檢測(cè)方法

YSH3487

100管/96樣

微量法

YSH3487-1

50管/48樣

紫外分光光度法

YSH3487-1

25管/24樣

紫外分光光度法


測(cè)定原理:

CA在檸檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性條件下,α-酮酸進(jìn)一步與苯肼反應(yīng),生成相應(yīng)的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm處有吸收峰,該波長(zhǎng)下吸光度的變化程度可反映出CA的含量。

自備儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水。
樣品中AA提?。?/span>

1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來(lái)水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

3.血清等液體:直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下:

1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計(jì)算:

單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:

單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬(wàn)。

注意事項(xiàng):

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測(cè)定的吸光值過(guò)高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰,因此,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4.檢出限為100μmol/L。

核糖核酶A12ELISA試劑盒 RNASE12免費(fèi)代測(cè)試劑

核糖核酶A11ELISA試劑盒 RNASE11免費(fèi)代測(cè)試劑

核糖核酶A10ELISA試劑盒 RNASE10免費(fèi)代測(cè)試劑

核糖核酶ⅢELISA試劑盒 RNASEN免費(fèi)代測(cè)試劑

核外切酶1ELISA試劑盒 EXO1免費(fèi)代測(cè)試劑

核受體相關(guān)蛋白1ELISA試劑盒 NURR1免費(fèi)代測(cè)試劑

核仁磷蛋白3ELISA試劑盒 NPM3免費(fèi)代測(cè)試劑

核仁磷蛋白2ELISA試劑盒 NPM2免費(fèi)代測(cè)試劑

核仁蛋白9ELISA試劑盒 NOL9免費(fèi)代測(cè)試劑

核仁蛋白8ELISA試劑盒 NOL8免費(fèi)代測(cè)試劑

核仁蛋白7ELISA試劑盒 NOL7免費(fèi)代測(cè)試劑

核仁蛋白6ELISA試劑盒 NOL6免費(fèi)代測(cè)試劑

核仁蛋白58ELISA試劑盒 NOP58免費(fèi)代測(cè)試劑

核仁蛋白4ELISA試劑盒 NOL4免費(fèi)代測(cè)試劑

核仁蛋白3ELISA試劑盒 NOL3免費(fèi)代測(cè)試劑
線粒體檸檬酸(MCA)含量測(cè)試盒肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測(cè)試盒/微量法100管/96樣

肉桂醇脫氫酶(CAD)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

肉桂醇脫氫酶(CAD)測(cè)試盒/微量法100管/96樣

肉桂-4-羥化酶(C4H)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

肉桂-4-羥化酶(C4H)測(cè)試盒/微量法100管/96樣

(LD)測(cè)試盒(測(cè)全血)/比色法50管/48樣

(LD)測(cè)試盒(測(cè)血清、組織)/比色法50管/48樣

乳含量(LA)測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣


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